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質量是四季青的根本
浙江天杭生物科技股份有限公司將本著銳意進取的精神,依舊貫徹四季青品牌“質量第一、精益求精、務實創新、誠信經營”的宗旨,生產出更好、更穩、更安全的產品,向牛血清的精品化持續邁進。公司按照2015年版現行《全國牛血清生產企業達標檢查手冊》要求,對軟件、硬件分別進行了修改與補充。
常見問題
COMMON PROBLEM
DO YOU EXPERIECE THESE PROBLEMS?
您是否遇到這些問題?
牛血清常見問題 黑膠蟲 平皿常見問題解答
  • 01
    要不要對血清進行熱滅活?
    一般以56℃、30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化,而補體所參與的反應有:溶細胞活性,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。
    實驗顯示,即使對血清進行正確的熱滅活處理,對大多數的細胞而言也是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。
    而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是"小黑點",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者認為是微生物的分裂擴增。
    因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節省您寶貴的時間,更確保您的血清的質量。
  • 02
    血清應該如何解凍?
    我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。
  • 03
    血清應該如何保存?
    我們建議血清應保存在-10℃~-30℃。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。
  • 04
    血清有沉淀該怎么辦?
    血清中沉淀物的出現有許多種原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以1000轉/分~2000轉/分稍微離心,上清液即可直接加入培養基內使用。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
    我們建議您在使用血清的時候,注意正確的血清解凍步驟,并盡量避免滅活血清及長時間的將血清置于高溫環境中。
  • 05
    牛血清的主要成份
    蛋白質是牛血清中主要成份之一。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,球蛋白,纖維粘連素(細胞促進細胞附著),α2巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用);胎牛血清中含胎球蛋白(促細胞附著)轉鐵蛋白(能結合鐵離子,減少其毒性和被細胞利用)。
    多肽:血小板促生長因子能促細胞分裂,是多肽家庭的主要成員之一,是主要的促細胞增殖因子;成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經細胞生長因子等,血清中含量雖很少,但對細胞生長也有一定作用。

    激素:激素對細胞的作用是多方面的。
    胰島素:促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細胞分裂有關。
    類胰島素生長因子:能與細胞表達的胰島素受體結合,從而有胰島素同樣的作用。
    促生長激素:促細胞增殖效應。
    氫化可的松:血清中含有定量的該成分,它可能兼有促細胞貼附和增殖作用,但有人證明,血清中的氫化可的松,如細胞密度高時可能有抑制細胞的作用和誘導其發生分化。

    其他成份
    氨基酸、葡萄糖、酮酸等對多種營養成分的合成培養基意義不大。與蛋白相結合狀態的微量元素對細胞培養有意義。
  • 06
    ★選擇適合自己細胞培養的牛血清的最簡單方法
    由于牛血清的批間差異和細胞種類不同,因此要找到一批適合自己用的牛血清的最簡單有效的方法是——用戶在購買牛血清前先試用樣品,通過篩選得到自己滿意的牛血清批號,然后把整個項目所需的牛血清一次買足,保持整個項目所需牛血清質量的一致性,這樣能夠確保項目如期順利完成。
  • 下拉更多
  • 01
    血清中為什么會出現“小黑點”?
    在培養細胞的過程中所發現的“運動微生物”,國內研究者習慣叫作“黑膠蟲”或“焦蟲”。早在1992年就有人提出在細胞培養中發現此小黑顆粒。它可以在400倍顯微鏡或更高倍鏡下觀察到,在顯微鏡下是半透明的圓點,分布在細胞間隙,作上下翻轉運動。
    經過熱滅活的血清,沉淀物的形成會顯著增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更加增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。此小顆粒在細胞培養過程中有增多的現象,但培養液不混濁,細菌、真菌等微生物檢查均為陰性,對細胞的影響程度根據細胞種類和狀態的不同不完全相同,這些小顆粒是因血清中的蛋白質凝聚析出造成的,對細胞的培養效果總體影響不大。
  • 01
    目前我國尚未有一次性培養基平皿統一的質量標準,作為用戶在購置培養基平皿時該如何選擇 廠家?
    首先,根據國食藥監械[2008]535 號文件摘選中培養基產品分類界定,培養基產品劃分在醫療器械管理范疇。
    其次、2013 年 11 月 26 日,國家食品藥品監督總局在《食品藥品監管總局關于印發體外診斷試劑分類子目錄的通知》中將培養基類產品劃分在《6840 體外診斷試劑分類子目錄(2013 版)》。
    第三、2014 年 9 月 5 日,國家食品藥品監督總局在《關于醫療器械生產質量管理規范執行有關事宜的通告》第四點中指出“自 2018 年 1 月 1 日起,所有醫療器械生產企業應當符合醫療器械生產質量管理規范的要求”。
    綜合以上三點,說明我國已從法規上對培養基類生產作出明確規定,所以在選擇培養基平皿供應商時,首先要選擇合法合規的生產企業。
  • 02
    成品預裝培養基平皿是否需要預培養?
    根據 2020 版《中國藥典》第四部 9203 藥品微生物實驗室質量管理指導原則中要求:“用于環境監控的培養基須特別防護,最好要雙層包裝和終端滅菌,如果不能采用終端滅菌的培養基,那么在使用前應進行 100%的預培養,以防止外來的污染物帶到環境中及避免出現假陽性結果”。目前市場上的一次性培養基平皿產品都是最終滅菌產品,所以使用前不需要預培養。
  • 03
    若三層真空包裝的一次性培養基平皿在使用過程中發現漲袋,能否繼續使用?
    建議不要帶進潔凈區使用,特別是 A、B 級區,會給潔凈區環境帶來污染風險。
  • 04
    實驗室自制培養皿滅菌后為何會出現水汽太多的現象?
    原因有兩個:第一、澆注平皿時培養基溫度太高,而澆注后沒有冷卻至室溫就蓋上蓋子;第二、滅菌柜的干燥性能不佳造成。
  • 05
    一次性培養基平皿沉降菌采樣后為何會出現培養基縮板的現象?
    如果潔凈區的溫濕度(溫度:18℃~22℃;相對濕度控制在 45%~65%;風速小于0.54m/s)沒有特殊要求,沉降菌采樣后縮板,可能是一次性平皿的質量問題;如果潔凈區的溫濕度有特殊要求,則要根據驗證來確定在沉降菌采樣時平皿的暴露時間。